【论坛回顾】先声诊断：微小残留病灶（MRD）临床应用及进展

2021-09-17 13:47

金秋九月，飒飒的秋风伴随全国各地生物技术行业人士的热情风尘仆仆吹来，来自广东、湖南、湖北、上海、北京、天津、浙江、江苏、安徽、重庆、贵州、山东等30多个省市和地区200+参展企业和赞助商共聚2021年9月10-12日第6届广州国际生物技术大会暨展览会。

先声诊断市场部及转化医学部执行总监宋超先生受邀参会，并在“分子诊断和伴随诊断高峰论坛”做《微小残留病灶（MRD）临床应用及进展》分享，以下为分享内容整理：

01.MRD概念与检测技术

根据CDE颁发的《生物标志物在抗肿瘤药物临床研发中应用的技术指导原则》，可将与药物研发相关的生物标志物分为以下六种类型：1.诊断性生物标志物（Diagnostic Biomarker）2. 预后性生物标志物（Prognostic Biomarker）3. 预测性生物标志物（Predictive Biomarker）4. 药效学生物标志物（Pharmacodynamic/Response Biomarker）5. 安全性生物标志物（Safety Biomarker）6. 监测性生物标志物（Monitoring Biomarker）。

MRD（微小残留病灶）作为监测性生物标志物，可通过动态检测，反映治疗过程中肿瘤细胞对药物的敏感程度或肿瘤负荷状态，可以成为复发风险的预测因子，是决定患者的危险分层、预后判断、后续治疗选择的关键因素之一，因此可成为临床治疗中进行疾病监测的良好指标。追本溯源，MRD的概念最早来源于血液肿瘤，目前CDE已发布多篇关于MRD的技术指导原则，比如《抗急性淋巴细胞白血病药物临床试验中检测微小残留病的技术指导原则（征求意见稿）》《多发性骨髓瘤药物临床试验中检测微小残留病的技术指导原则（征求意见稿）》等。

循环肿瘤 DNA（circulating tumor DNA，ctDNA）作为评估MRD的重要检测手段，其相关研究在实体肿瘤中证据不断累计，2021年3月，**发布首个《肺癌MRD的检测和临床应用共识》，同年4月美国纽约州卫生部临床实验室评估项目（CLEP）已批准其Guardant Reveal液体活检产品用于检测和监测早期癌症患者（结直肠癌，CRC II和III期）的MRD检测。将MRD 作为一个“划时代”的标志物，已然蓄势待发。

在《肺癌MRD的检测和临床应用共识》中将肺癌MRD定义为经过治疗后，传统影像学（包括PET/CT）或实验室方法不能发现，但通过液体活检发现的癌来源分子异常，代表着肺癌的持续存在和临床进展可能。具有3M的特点，即Minimal（微小）、Measurable（可测量）、Molecular（分子）。

02.MRD作为预后标志物

一项针对MRD的荟萃分析显示，相比于传统临床/影像学检查，MRD检测能更早提示患者肿瘤的复发或较差的预后。在不同癌种中，具体提前时间分别为，鼻咽癌6个月，乳腺癌7.9-11个月，胰腺癌6.5个月，肺癌70天-5.2个月，结肠癌167天-10个月。

首次强调 ctDNA 在 MRD 监测中的应用研究是由 Turner 等对55例高复发风险的早期乳腺癌患者的术后血液样本进行ctDNA检测的报道。该研究显示，ctDNA检测在治疗结束时预测疾病复发有很高的准确性，比临床监测提前 7.9 个月检测到疾病复发。

在肺癌领域，TRACERx 研究对 24 例早期 NSCLC 患者术后外周血 ctDNA 进行动态监测。在 14 例复发患者中，其中 13 例在影像学复发前即可在动态 ctDNA 中检测出至少突变，很好的体现了ctDNA 的复发超前预判效能。斯坦福大学 Diehn团队对40 例根治性切除术后的I~III期肺癌患者的术后及动态样本进行ctDNA检测，结果提示 94%的肿瘤复发患者在术后首次血标本中即可检测ctDNA阳性，ctDNA检测阳性可早于约 72%的影像学诊断的肿瘤复发。

以上的研究都回答了MRD作为预后标志物的价值和意义，MRD的状态同患者的疾病进展密切相关，MRD对于疾病预后价值的判断与预测是未来的重要应用方向，可以帮助患者分层，选择合适的人群接收合适的治疗方式。

03.MRD作为预测标志物

IMvigor010研究的结果，是生物标志物在早期肿瘤根治术后辅助治疗中应用的里程碑式的研究，给MRD的预测意义带来了巨大的价值。IMvigor010是一项全球性多中心随机III期临床试验，旨在评估阿替利珠单抗在肌层浸润性尿路上皮癌辅助治疗中的作用，主要研究终点为治疗组的无疾病生存时间。该研究一共入组了809位患者，随机分配到阿替利珠单抗治疗组（N=406）和观察组（N=403），共进行了中位时间为21.9个月的随访。在2021年3月《柳叶刀·肿瘤学》上发表的分析结果显示研究没有达到主要研究终点，治疗组的DFS（无病生存期）为19.4个月，而观察组的无病生存时间为16.6个月，二者差异没有统计学意义（p=0.24）。阿替利珠单抗辅助治疗不能显著延长肌层浸润性尿路上皮癌患者无病生存时间。

对患者的治疗前的ctDNA检测结果进行回顾性分析发现，辅助治疗开始前C1D1 MRD为阳性的患者，经阿替利珠单抗辅助治疗后相比观察组显著提升DFS，中位DFS为5.9 vs. 4.4月（p=0.0024）。在MRD阴性的患者中，治疗组和观察组的DFS没有差异（HR=1.14 (95% CI: 0.81–1.62); 中位DFS均为未达到），表明MRD阴性的患者预后普遍较好，接受阿替珠单抗辅助治疗并没有带来明显的生存期上的获益。

未来MRD作为预测标志物，将从回顾性研究的逐步走向前瞻性研究。其中比较经典的是COBBRA研究、PEGASUS研究、ACT-3研究、MERMAID-1 研究。这几项研究均通过ctDNA 检测来评估肿瘤患者MRD状态，进一步提示MRD状态指导临床辅助治疗策略制定是未来应用方向。

先声诊断在MRD领域较早进行产品布局，并且同时具备血液肿瘤MRD及实体瘤的ctDNA检测技术和产品。先声诊断在一项同中山中山大学肿瘤防治中心儿童B-ALL的MRD研究中证明，采用先声诊断SimcereDx B-lympho-MRD Monitoring产品，比传统的流式细胞方法更加灵敏。先声诊断也积极布局药企服务业务，正在与ANTENGENE、INNOCARE等药企积极展开MRD伴随诊断的临床研究。

先声诊断B淋巴细胞肿瘤IgH/IgK重排克隆MRD产品，适用于B-急性淋巴细胞白血病、多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞白血病。国内首批研发转化，基于NGS技术平台，灵敏度高达百万分之一级别，拥有**生信分析专利技术。在评估治疗效果、监测疾病缓解、预警复发可能、新药伴随诊断等方面发挥强大作用。目前已与众多业内专家开展项目合作，累计检测达到上千例。

先声诊断实体瘤超高深度ctDNA动态监测产品，借助机器学习技术设计202基因专属panel，配合35,000×超高深度测序、SIM-Seq生信降噪体系，可实现低至0.01%的超低频率ctDNA突变检出，满足各类实体肿瘤的MRD评估、风险分级、疗效监测等临床需求。基于优势检测平台，先声诊断正积极与多家临床机构开展大规模临床研究，探索ctDNA在早期实体瘤MRD监测领域的应用。