中科森辉微球 | 高效犬血免疫球蛋白的分离纯化工艺

IgG是免疫球蛋白G的缩写，IgG是人和动物血清最主要的抗体成分。IgG的功能、作用主要在机体免疫中起保护作用，大多数抗菌、抗病毒产生的抗体类型，多数为IgG型抗体，例如对麻疹、甲型肝炎等的抗体，能有效预防相应的感染性疾病。

犬类从古至今，一直是人类最广泛饲养的宠物和助手。随着人类生活水平的提高，人们养宠物犬越来越多，甚至在农村犬除了作为助手以外，人们也越来越倾向于宠物饲养。但人类对于犬相关性疾病的认识还非常不足，犬IgG是体液免疫的重要抗体，其反应犬个体的免疫水平和某些疾病的感染情况，犬血IgG与人血清IgG类似，也可以用来治疗某些疾病。

动物血清中抗体的分离纯化，除了Protein A亲和介质具有良好的纯化效果外，多肽配基亲和介质具有配基分子量小、稳定性高、成本低的优势，具有重要的应用前景。针对动物血清中抗体的纯化需求，中科森辉基于**院过程工程研究所筛选的多肽亲和配基，制备了高载量、高特异性的多肽配基亲和介质（SH-7D 亲和层析介质）。

1.原料预处理

离心：血清离心，取上层清液

脱脂：离心后上清脱脂

调pH：脱脂后上清用纯水稀释，使用1N盐酸调节pH

离心：样品再次离心，取上清液备用

2.纯化工艺

Buffer A：20 mM PB

Buffer B：20 mM PB +0.5M NaCl

介质：SH-7D亲和层析介质

层析：先用Buffer A平衡层析柱；然后上样。上样结束后用Buffer A 淋洗紫外至基线。最后用Buffer B进行洗脱得到高纯度的犬IgG。

HPSEC检测：分析柱TSK gel G3000 SWxl（300x7.8 mm I.D.）IgG单体+二聚体大于93%。（药典2020通则3122）

SDS-PAGE电泳法：（药典2020：通则0541）纯度大于95%。

项目已达中试阶段

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