再次突破！安普未来最快8分钟完成核酸检测实验

2020-04-15 11:44

如何将传统分子检测方法变的更加简单易懂、操作方便和快速精准。一直是分子检测行业的一大课题。各个厂家和科研院所都在这方面投入了大量的时间和金钱。

安普未来有幸在该领域完成了突破和革新。在荧光检测领域，自主研发的MIRA技术将60分钟以上的核酸扩增阶段，缩短到20分钟。

其开发了“核酸胶体金试纸条检测法”，可彻底抛弃掉高昂的检测设备，仅需配备简单的温控仪器即可（如金属浴、水浴锅等），甚至42°温水和利用人体温度亦可完成扩增反应，且核酸扩增时间进一步缩短到10分钟不到。其结果的准确率与传统PCR检测方式准确率一致。

具体如何操作呢？

1	采用我司自主开发的快速核酸释放剂提取核酸（核酸释放剂与样本混匀，室温静置5分钟即可取上清作为核酸模板），或者采用市场常见“离心柱法”和“磁珠法”提取核酸作为模板亦可；
2	取上述模板2μL加入到复融后的反应液中，通过上述各种加热手段，保证加热温度在37°~42°之间10分钟即可。
3	上述反应时间结束后，向反应液中加入少许无菌水稀释，后直接插入试纸条，则马上可通过试纸条上的条带颜色变化，从而判定阴阳性。

观察检测结果

自主研发用时，引物设计需注意！

核酸试纸条三明治夹心检验法探针设计：在上下游引物中间设计一条长度为46-52nt与目的片段互补序列；5’端修饰一个抗原标记（典型FAM）;5’端和3’端中间位置标记一个dSpacer(THF)；3’端标记一个修饰基团，如胺基、生物素或C3-Spacer，同时要求下游引物5’端标记一个修饰基团。

该方法极其适用于现场核酸检测。可应用于传染病初筛、食品安全、宠物疾病检测、活体市场抽检等各种不具备完整分子检测条件下的核酸测试。对操作人员专业水平要求低，检测结果可信度高。

MIRA反应原理

试纸条汲取反应液

安普未来生物 MIRA 助力新冠疫情抗战一线！

新型冠状病毒现在最准确的确诊方法是核酸检测，但传统的荧光定量PCR方法需要采取病毒提取、反转录、荧光定量扩增等多步操作，完成整个检测实验长达3小时以上。并且该病毒有可能通过气溶胶传播，实验中病毒的核酸提取过程需要多步骤处理标本，操作复杂，检测人员被感染的风险几率高。为了最快控制住疫情，我们迫切需要一种更安全、简便、快速的检测方法，这就是安普未来的新型冠状病毒恒温快速检测方法。

潍坊安普未来生物科技有限公司创业团队，历经十年自主研发出多酶恒温快速扩增(即Multienzyme Isothermal Rapid Amplification ，以下简称MIRA)技术，这是一种恒温核酸快速扩增技术，依靠多种功能蛋白在常温下完成核酸的快速扩增，可替代目前的聚合酶链反应 (PCR)技术。

除了前述的胶体金跨速核酸检测法以外，公司还具备荧光型检测方法。结合本公司所**的超快速核酸提取试剂（5分钟提取DNA/RNA用于扩增）和荧光检测仪，可将整个核酸检测实验的全部时间缩短至8至20分钟内完成。

安普未来的解决方案操作十分简单:

核酸提取

直接取咽拭子等样品放入管A中（含裂解液，可灭活病毒）；

管A放入95℃-100℃水浴或者金属浴10分钟；

扩增反应

向含有冻干试剂（冻干试剂包含了生物酶与各反应组分；可常温运输，便捷高效）的反应管中加入42.5 μL R buffer使其复溶；

取核酸提取步骤中提取完成的样本3-5μL 加入反应管；

最后在反应管加入2.5μL启动B buffer，盖上盖充分混匀后上机反应。反应温度为42℃，时长20min，实时显示荧光扩增曲线。其结果分析与荧光定量PCR类似，简单易懂。